免疫荧光的常见荧光

一、免疫荧光的常见荧光

1)FITC

2)RB200

3)TRITC

4）镧系：Eu、Tb

5)PE

6）其它

常见荧光素的特性

1)FITC：黄色结晶粉末，吸收光：490~495nm，发射光：520~530nm，明亮的黄绿色荧光。

2)RB200：橘红色粉末，吸收光570nm，发射光595~600nm，橘红色荧光。

3)TRITC：紫红色粉末，吸收550nm，发射光620nm，橙红色荧光。

4）镧系：Eu、Tb

5)PE：吸收光490~560nm，发射光595nm，红色荧光。

6）其它：酶作用后产生荧光物质。 酶 底物 产物 激发光 发射光

Β-G MUG MU 360 450

AP MUP MU 360 450

HRP HPA 二聚体 317 414

⑷合适荧光素的选择

1）具有与蛋白质形成共价键的化学基团。

荧光素-N=C +NH-蛋白质 荧光素-N-C-N-蛋白质

‖ ︱ ︱‖ ︱

S H H SH

2）荧光效率高，标记后下降不明显。

3）荧光色泽与背景色泽对比鲜明。

4）标记后能保持生物学活性和免疫活性

5）标记方法简单、快速。

6）安全无毒

二、荧光增白剂里的化学成分对眼睛，皮肤有害吗？

荧光增白剂可以吸收不可见的紫外光，（波长范围约为360—380 nm），转换为波长较长的蓝光或紫色的可见光，因而可以补偿基质中不想要的微黄色，同时反射出比原来入射的波长在400——600 nm范围的更多的可见光，从而使制品显得更白、更亮、更鲜艳。在日常生活中，接触荧光剂的机会很多。只要不超过一定标准，会给我们生活带来不少好处。如果过量的与它接触，会对人体造成伤害。科学实验表明，荧光剂被人体吸收后，不象一般的化学成分容易被分解。万一身上有伤口，使其与人体中的蛋白质相结合，便会阻碍伤口的愈合，并且除去它非常不易，只有通过肝脏的酵素分解，这无疑的加重了肝脏的负担，据医学临床实验证实，荧光物质可以使细胞产生变异性，变异荧光物质可以接收可见光比紫外线波长更短的电磁波或放射线，在将这些能量转为波长较长的可见光。这样，如果对荧光剂接触过量，可能有潜在的致癌因素。虽然目前没有证明荧光剂吸收多少会对人体造成伤害，但是荧光剂既然被列为潜在致癌因素之一。 本人就是化学教师,我说的并非危言耸听啊,你们公司既然生产的是化学品,就应该有防护措施,比如戴防毒面具,小伙子,挣钱固然重要,但也要注意身体啊

三、呼吸道分泌指示剂有哪些 各有什么优缺点

以碘化钾-淀粉作外指示剂的方法,适用于多种药物及其制剂的亚硝酸钠滴定法.亚硝 酸液（0.1mol/L）在过量1~2滴（0.05ml~0.1ml）时,可灵敏地指示终点.但由于被滴定溶 液的酸性强,未达到终点时,碘化钾在酸性条件下遇光可被空气氧化游离出碘,与淀粉显蓝 色,而混淆终点.并且由于多次外试,也会损失供试品而增加误差,所以初次使用者较难掌 握.有时须预先计算滴定溶液的消耗量,在接近理论终点前,再缓缓滴定和取测定液试验终 点,这样可减少供试品损失.应用外指示剂时,应注意其灵敏度与反应的体积有关,如果测定与标化的体积不一致,往往会引入一定偏差,有的甚至高达+0.9%或1.5%.为了避免这些偏差,可使测定时溶液的 体积与标化时亚硝酸钠滴定液的体积一致或测定与标化均进行空白校正[2].

四、如何确诊新冠病毒感染？

疑似病例具备以下病原学证据之一者即可确诊为新冠病例：

1、呼吸道标本或血液标本实时荧光RT-PCR检测新型冠状病毒核酸阳性；

2、呼吸道标本或血液标本病毒基因检测序，或已知的新型冠状病毒高度同源。

疑似病例：结合下述流行病学史和临床表现综合分析

1、流行病学史：

（1）发病前14天内，有武汉市及周边地区或其它有病例报告社区的旅行史或居住史；

（2）发病前14天内与新型冠状病毒感染者有接触史；

（3）发病前14天曾接触过来自武汉市及周边地区，或来自有病例报告社区的发热或有呼吸道症状的患者；

（4）聚集性发病。

2、临床表现：

（1）发热和呼吸道症状；

（2）具有上述肺炎影像学特征；

（3）发病早期白细胞总数正常或降低，或淋巴计数减少。

有流行病学史中的任何1条，且符合临床表现中任意2条。无明确流行病学史的，符合临床表现中的3条。

五、鲁米诺尔的化学分子式

C8H7N3O2

鲁米诺又名发光氨。可以鉴别经过擦洗，时间很久以前的血痕。它常温下是一种黄色晶体或者米黄色粉末，是一种比较稳定的化学试剂。它的化学式是C8H7N3O2。同时，鲁米诺又是一种强酸，对眼睛、皮肤、呼吸道有一定刺激作用。

在检验血痕时，鲁米诺与血红素（血红蛋白中负责运输氧的一种蛋白质）发生反应，显出蓝紫色的荧光。鲁米诺的灵敏度可以达到一百万分之一。即1滴血混在 999，999滴水中时也可以被检验出来。不过它与其他具有氧化性的物质也发生反应，但是显示的颜色和显色的时间长短都是不同的

在刑侦学中的鲁米诺反应，简单点讲就是在凶案现场只要有血液溅出并沾到任何物体上，不管事后经过何种方式的清除，哪怕是过了很长的一段时间，只要是用鲁米诺试剂喷洒在其上并在暗环境（或是暗视线条件）下观察的话，在原沾有血迹的地方就会有因发生荧光反应而呈蓝紫色的荧光。

鲁米诺（luminol），又名发光氨，英文名5-Amino-2，3-dihydro-1，4-phthalazinedione。

它常温下是一种黄色晶体或者米黄色粉末，是一种比较稳定的化学试剂。它的化学式是C8H7N3O2 结构式在下面的图图里面有。同时，鲁米诺又是一种强酸，对眼睛、皮肤、呼吸道有一定刺激作用。

法医学上，鲁米诺反应又叫氨基苯二酰一胼反应，可以鉴别经过擦洗，时间很久以前的血痕。生物学上则使用鲁米诺来检测细胞中的铜、铁及氰化物的存在。

3-硝基邻苯二甲酸可作为鲁米诺的合成原料。3-硝基邻苯二甲酸与肼在高沸点溶剂（如二甘醇）中发生缩合反应，失去一分子水，生成3-硝基邻苯二甲酰肼。然后以保险粉还原3-硝基邻苯二甲酰肼中的硝基，得到3-氨基邻苯二甲酰肼，即是鲁米诺。

鲁米诺只有用氧化剂处理过才会发光。通常使用双氧水和一种氢氧化物碱的混合水溶液作为激发剂。在铁化合物催化下，双氧水分解为氧气和水：

2 H2O2 → O2 + 2 H2O

实验室中常以铁氰化钾作为催化剂铁的来源，而法医学上的催化剂则恰好是血红蛋白中的铁。很多生物系统中的酶也可催化过氧化氢的分解反应。

鲁米诺与氢氧化物反应时生成了一个双负离子（Dianion），它可被过氧化氢分解出的氧气氧化，产物为一个有机过氧化物。该过氧化物很不稳定，立即分解出氮气，生成激发态的3-氨基邻苯二甲酸。激发态至基态转化中，释放的能量以光子的形式存在，波长位于可见光的蓝光部分。在检验血痕时，鲁米诺与血红素（hemoglobin，血红蛋白中负责运输氧的一种蛋白质）发生反应，显出蓝绿色的荧光。鲁米诺的灵敏度可以达到一百万分之一。即1滴血混在 999，999滴水中时也可以被检验出来。不过它与其他具有氧化性的物质也发生反应，但是显示的颜色和显色的时间长短都是不同的。

即使犯罪现场的血迹已经被擦过或清除过，调查者依旧可以使用鲁米诺找到它们的位置。实际上，调查者在要调查的区域内喷洒鲁米诺和激发剂溶液，血中的铁立即催化鲁米诺的发光反应，使其产生蓝色光芒。该反应需用的催化剂量非常少，因此鲁米诺可以检测痕量的血迹。发光大约持续30秒钟，可通过长曝光的照片观察出，其周围环境不可以太亮。

鲁米诺有一些缺点限制了它的应用：

* 鲁米诺在铜、含铜合金、辣根或某些漂白剂的存在下发出荧光。因此如果犯罪现场被漂白剂彻底处理过，则鲁米诺发出的荧光会强烈掩盖任何血迹的存在。

* 鲁米诺可以检测出动物血及尿中的少量血，因此如果待测房间中含有尿或动物血，检测结果会有偏差。

* 鲁米诺与排泄物反应，发出的光与和血反应发出的是相同的。

* 鲁米诺可能干扰其他检测，然而鲁米诺并不干扰DNA的提取。